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Elisa实验中的标准曲线相关问题解答

时间:2017-03-13 10:50来源:上海极威生物科技有限公 作者:极威生物 点击:

Elisa实验中有很多因素都会影响到标准曲线的结果,其中最关键的主要因素就包括配制和操作。

前几天天津中医药大学的刘老师问:Elisa实验中我是否可以改变标准品的配制?以及影响Elisa实验中的标准曲线的主要因素有哪些?

对此,我司潘技术做了以下回答:

1)不可以改变标准品的配制。应当用指定的稀释液适当稀释的重组标准品,如Elisa试剂盒说明书中所示。

2)在混合和溶解标准品的过程中,切记应避免起泡。

3)已经溶解好的标准品静置至少15分钟时间最佳(可根据说明书进行操作)。在使用之前应当轻轻混匀,确保所有的固体已经溶解。

4)在制作Elisa标准曲线时,要确保所有的稀释步骤都已经准确完成。稀释时应当注意及时更换枪头。在移液之前将稀释液充分混合。

影响标准曲线的主要因素有哪些?

1)不完全的洗涤会降低测定精确性,导致不理想的标准曲线结果。务必确保洗板机的正常工作,确保酶标板各孔被充分洗涤却不干燥。

2)不合理的移液操作会导致高CV值和不理想曲线。

3)在制作标准曲线的过程中,不正确的移液方式会导致错误的稀释,从而使错误的数值进入标准曲线中,或者产生非线性曲线。确保移液器正常工作。每个孔中的液体体积不等可能就是移液器失灵或者枪头使用不当所致。

4)在测定不同板中的样品时,每一个板都对应一条标准曲线。技术错误或者不同的孵育情况,环境条件都会引起酶标板之间产生不同结果。一条标准曲线测定的样品值必需是在相同环境下产生的,否则就是无效值。

以上8点是我司潘技术为客户刘老师所做的解答,不仅解开了刘老师一直以来的困惑,也让刘老师对我们的技术服务竖起了大拇指!谢谢刘老师的合作。

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